人血管紧张素Ⅱ受体2抗体(AT2R-Ab)酶联免疫分析试剂盒操作说明与判定2019-03-11
人血管紧张素Ⅱ受体2抗体(AT2R-Ab)酶联免疫分析elisa试剂盒
试剂盒操作说明
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照不加样品及酶标试剂，其余各步骤作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50ul。然后在待测样品先加样品稀释液40ul，然后再加待测样品10ul。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动摇匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板摸，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50ul，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色试剂A50ul,再加入显色剂B50ul，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
10.终止：每孔加终止液50ul，终止反应（此时蓝色立传黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液15分钟以内进行。
结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥ 1.00；阴性对照平均值≤ 0.10.
临界值计算：临界值＝阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品OD值＜临界值者为人血管紧张素Ⅱ受体2抗体(AT2R-Ab)阴性
阳性判定：样品OD值≥临界值者为人血管紧张素Ⅱ受体2抗体(AT2R-Ab)阳性
推荐文章
