人Elisa试剂盒注意事项与操作步骤2020-12-16

人Elisa试剂盒操作步骤 ：

1．用盖片镊人Elisa试剂盒将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将人Elisa试剂盒培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

人Elisa试剂盒注意事项:

       1. 人Elisa试剂盒解冻与存放：-20℃取出后建议放入2～8℃冰箱中解冻约，每隔一段时间轻轻摇晃均匀，不可直接放入温度较高处解冻，避免因温度改变太大，造成蛋白质凝集而出现沉淀，血清的质量下降。若短期无法用完一瓶，建议无菌分装,再放回冷冻，避免反复冻融。4℃长时间保存后血清中的变性脂蛋白及纤维蛋白，形成絮状物质变差。

      2. 人Elisa试剂盒是否灭活：加热可灭活血清中补体系统，在极少数情况下（培养ES细胞，平滑肌细胞时）建议灭活，在培养其余细胞时不建议灭活血清。血清灭活非常容易产生沉淀，如必须灭活请按56℃，30 min，轻微摇晃原则操作，灭活温度高、时间长、摇晃不均都容易产生沉淀。

      3.人Elisa试剂盒培养基：无血清培养基在结果重复性、细胞体外分化方面有优势，但是，血清仍然是培养液中最基本的添加物，尤其是在原代培养或细胞生长状态不良时，常常会先使用有血清的培养液进行培养，待细胞生长旺盛后再换成无血清培养液。