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PCR耗材选择原则方法2021-10-20

1、看材质

PCR 耗材一般都是 PP 材质,因为 PCR/qPCR 耗材通常会与试剂或样品直接接触,而聚丙烯(PP)材质是生物学惰性材料,表面不易于粘附生物分子,且有着良好的化学耐性及温度耐受性(可以 121 ℃ 高压灭菌,也可以承受热循环过程中的温度变化)。赛普PCR耗材皆是PP材质。

2、看PCR 管/板体积

不同体积的 PCR 管/板,该如何挑选?

选择宗旨:依据具体的实验要求选用合适的产品。PCR管的体积大多数都可以满足 PCR 反应的要求。对于低到中通量的PCR/qPCR实验,PCR管是比较理想的选择,单个管和联管是两种最常用的形式。

单管提供了设置准确运行反应数量的灵活性。另外,反应体积更大时,可选择0.5 mL规格的单管。

联管通常以8或12管形式,管盖分开或带有管盖。可兼容单通道和多通道移液器,适用于低通量和中通量实验。带有管盖的联管可独立打开和关闭样品管,以防止样品污染。

常见反应管的规格及体积:

单管/联管:0.5 mL,0.2 mL,0.1ml,0.15 mL

96 孔板:0.2 mL,0.15 mL,0.1ml

384 孔板:0.02 mL

单管和连管都有平盖和凸盖之分,赛普PCR单管及八联排管都为平盖。而平盖和凸盖各有优点,具体可参考下面的信息。

3、 看管壁厚度

管壁厚度会直接影响热传导率,极薄的壁厚可优化热传递减少循环时间。超薄壁塑料比标准版薄约50%,进一步减少了热障,从而带来更快,更稳健的反应。赛普生物PCR耗材皆是超薄管壁。

4、看颜色

PCR板通常可提供多种不同的颜色形式,以便于对于样品的视觉区分和鉴别,特别是在高通量实验中。对于普通的 PCR 反应选用透明或者彩色的 PCR 管都是可以的,而透明的 PCR 管更有助于进行样品分类管理。

尽管塑料的颜色对DNA扩增没有影响,但 qPCR 更推荐选用优质的白色 PCR 耗材。由于 qPCR 需要实时定量检测荧光信号强度,更需要灵敏、精确的荧光信号传递。实验证明,与传统的透明 PCR 产品相比,白色 PCR 产品可最大程度地反射荧光信号,减少孔间信号交叉污染,可优化实时荧光定量 PCR 的结果。

不同品牌仪器,由于荧光检测器位置设计不同,请参考生产厂家推荐的耗材。对于Bio-Rad CFX或Roche 480荧光定量PCR仪,厂家推荐使用白色PCR板。赛普生物PCR板既有白色,也有透明的,也有多种规格,适配市面上常见的PCR仪

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