细胞培养的开始,就是复苏细胞。如何有条不紊地让细胞从沉睡中苏醒?高效的细胞复苏流程如下:
细胞复苏流程:
1、将冻存的细胞从液氮罐中取出,立即放入37°C的水浴中进行融化,轻柔晃动,加速融化,直到小瓶中只剩下一小块冰,时长应控制在1min中;
2、用70%乙醇擦拭瓶外后转移无菌操作台中,打开瓶盖前,用酒精灯火焰对瓶口进行消毒;
3、将预加热的新鲜完全培养基滴入小瓶中。缓慢用移液枪吸取瓶中液体至15ml离心管中,加入适量浓度和体积的完全培养基,轻柔混合均匀;
4、200 × g左右细胞悬浮液离心5-10分钟。实际的离心速度和持续时间因细胞类型而异。弃掉上清,加入新鲜完全培养基重悬细胞,并将其转移到适当的培养容器和推荐的培养环境中。