酶联免疫吸附试验 (Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ElISA)是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。ElISA实验操作简单，但其影响因素却很多,其中一个因素的改变可能会影响到其它条件的改变,最终影响整个结果的准确性。ElISA实验操作要点：
1、标本
对于血清标本，采集血液时需注意溶血。此外，为避免细胞裂解释放出目标检测分子影响实验，检测物宜进行离心去除细胞成份。
2、加样
注意将所加物加至板孔底部，避免加在孔壁上部，不可溅出或产生气泡。加不同物质时应更换枪头，以免发生交叉污染。另外在显色时，最好使用排枪迅速完成加液过程，以减少反应时间不一致引起的孔间差异。
3、稀释
在稀释过程中,要注意使用同一微量加样器、同一类枪头和容器,保证所稀释液体容量一致。
4、孵育
37℃恒温箱孵育时，酶标板应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,最后将酶标板放在湿纱布上，并且酶标板不能叠放,以保证各板的温度能迅速平衡。孵育时间一般为1～1.5h，不宜过长。如采用4℃孵育,则应将酶标板包好,以免试剂与外界反应或蒸发。
5、洗涤
应严格按要求洗涤,保证洗涤液注满各孔,洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干,并应严格遵守洗涤时间,不得马虎。
6、显色
显色液量不可过多，加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色系统后要避光反应，显色液量不能过多，以免显色过强。
7、读板
比色前应先用洁净的吸水纸拭干酶标板底附着的液体,以减少比色受干扰,然后将板正确放入酶标仪的比色架中。酶标仪应安置在避光环境下,操作室温宜在15～30℃,在使用前应先预热酶标仪15-30分钟,这样测定结果更加稳定。
