ELISA双抗夹心法常见样本制备：
1、血清
全血标本自然凝集30min后1000×g离心15min，取澄清，即可检测。澄清可存放于-20℃，避免反复冻融。
2、血浆
可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30min内于2-8℃、1000×g离心15min，或将标本放于-20℃，避免反复冻融。（注意：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测）
3、细胞上清
收集细胞培养液，离心取上清，-20℃存放，避免反复冻融。
4、细胞裂解样本
1）.收集细胞后，用预冷的10mM PBS洗3次，5000×g离心5min。
2）.细胞计数，离心弃上清；
3).加PMSF至细胞裂解液中，终浓度为1mM；
4).按每1×107个细胞，加入1ml细胞裂解液（含PMSF），冰上裂解 30min，其间上下颠倒使裂解更充分，超声波破碎处理；
5）.4℃，10000×g离心10min；
6）.检测细胞裂解样本总蛋白浓度；
7）.整个过程需在冰上操作，防止蛋白降解。
5、.组织裂解样本
1）.加PMSF至细胞裂解液中，终浓度为1mM；
2）.预先将待检组织用剪刀剪碎，液氮研磨，再按每100mg组织加1 mL裂解液，用研磨器进行研磨，得到的匀浆液可利用超声破碎处理；
3）.4℃，10000×g离心10min，取上清，-80℃存放；
4）.检测组织裂解样本总蛋白浓度；
5）.整个过程需在冰上操作，防止蛋白降解。
6、尿液
收集尿液后，1000×g离心20min，取上清，-20℃或者-80℃存放，避免反复冻融。
7、人乳
收集样本后，10000×g离心15min，取澄清部分，浑浊液再次离心，取澄清，收集澄清部分，-20℃存放，避免反复冻融。
