测定原理：
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，在570 nm有特征吸收峰；通过测定570 nm吸光度，来计算氨基酸含量。
测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到570 nm，蒸馏水调零。
2. 空白管：取EP管，加入50μL蒸馏水，500μL试剂二，500μL试剂三和50μL试剂四，混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温15 min，冷却后反复颠倒EP管数次，于570nm测定吸光值，记为A空白管。显色后务必在30min内测完。
3. 标准管：取EP管，加入50μL标准品，500μL试剂二，500μL试剂三和50μL试剂四，混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温15 min，冷却后反复颠倒EP管数次，于570nm测定吸光值，记为A标准管。显色后务必在30min内测完。
4. 测定管：取EP管，加入50μL上清液，500μL试剂二，500μL试剂三和50μL试剂四，混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温15 min，冷却后反复颠倒EP管数次，于570nm测定吸光值，记为A测定管。显色后务必在30min内测完。
注意：空白管和标准管只需要测定一次。
氨基酸含量计算公式：
（1）按照样本质量计算
氨基酸含量（μmol /g鲜重）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×（V样总÷V样）÷W
=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管) ÷W
（2）按照样本蛋白浓度计算
氨基酸含量（μmol /mg prot）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]÷（V样×Cpr）
=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管) ÷Cpr
（3）按照细胞数量计算
氨基酸含量（μmol /104 cell）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)] ×（V样总÷V样×细胞数量）
=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管) ÷细胞数量
（4）按照液体体积计算
氨基酸含量（μmol /mL）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]÷V样
=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)
C标准品：标准品浓度，1 μ mol/mL；V标准品：反应体系中加入标准品体积，0.05 mL；W：样品质量，g；V样：反应体系中加入样品提取液体积，0.05 mL；V样总：样品提取液总体积，1mL，Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL。
注意事项：
1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。
2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。
3. 脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
4．最低检出限为100μmol/L。
